Пцр при молочнице расшифровка

[09-001]
Candida albicans, ДНК [реал-тайм ПЦР]

320 руб.

Это молекулярно-генетическое исследование, позволяющее выявить генетический материал грибов Candida albicans – возбудителей кандидоза.

Синонимы русские

Дрожжеподобные грибы рода Candida, возбудитель молочницы (кандидоза).

Синонимы английские

C. albicans, NAA (DNA, PCR).

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки), первую порцию утренней мочи, соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.

Общая информация об исследовании

Candida albicans – дрожжеподобные микроскопические грибы, распространенные повсеместно. У человека и животных носительство грибов рода C. аlbicans на слизистых ротовой полости встречается в 46-52  % случаев, в фекалиях – в 80  %, на коже – в 9,5  %. На слизистой влагалища дрожжеподобные грибы выявляются у 12  % здоровых женщин и у 30-85  % беременных (в последнем триместре беременности).

Данный микроорганизм относится к условно-патогенным, т. е. в умеренных количествах является нормальной частью микрофлоры и вызывает заболевания только при избытке. Чрезмерному росту этих микроскопических грибов препятствует нормальная бактериальная флора кожи и слизистых, а также защитные факторы организма. Заболевание, вызванное грибами рода Candida, – кандидоз возникает при нарушениях иммунных механизмов защиты.

Причиной возникновения кандидоза может явиться иммуносупрессивная терапия, пересадка донорских органов, лечение кортикостероидами, радиационные поражения, бесконтрольное применение антибиотиков, злокачественные новообразования, длительное применение контрацептивов. Кандидоз часто развивается на фоне сахарного диабета, дисфункции щитовидной и паращитовидных желез. Особое значение имеет кандидоз при ВИЧ-инфекции, он входит в число СПИД-маркерных инфекций – у человека с нормально функционирующим иммунитетом не развивается. 90  % больных СПИДом на той или иной стадии заболевают кандидозом.

Кандидозный вульвовагинит – молочница – очень распространенное заболевание среди женщин детородного возраста: около 75  % всех женщин в течение жизни переносят хотя бы один эпизод острого кандидоза вульвы и влагалища. У мужчин сахарный диабет и/или несоблюдение личной гигиены может привести к развитию кандидозного баланопостита – воспаления головки и крайней плоти полового члена. И, хотя кандидоз не относится к инфекциям, передающимся половым путем, незащищенный половой контакт при остром или хроническом вульвовагините может привести к воспалению полового органа мужчины.

Возможен также кандидоз мочевыводящих путей, который развивается чаще как внутрибольничная инфекция. Факторами риска в данном случае являются сахарный диабет, катетеризация мочевого пузыря, мочекаменная болезнь, длительное применение антибиотиков широкого спектра действия. Пациенты при этом жалуются на частые болезненные мочеиспускания.

Молекулярно-генетический метод позволяет с высокой чувствительностью и специфичностью выявить C. albicans в исследуемом материале. Отрицательный результат теста исключает роль дрожжеподобного гриба C. albicans в воспалительных заболеваниях мочеполовых органов. При положительном результате требуются дополнительные исследования: микроскопия на псевдомицелий гриба и посев материала на грибы рода Candida с определением чувствительности к антимикотическим препаратам. Необходимо также исключать другие вероятные инфекции мочевыводящих путей.

Для чего используется исследование?

• Для исключения роли Candida albicans в развитии урогенитальных заболеваний.
• Для диагностики урогенитального кандидоза.
• Для оценки эффективности противогрибковой терапии кандидоза.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на кандидозный вульвовагинит (при зуде и жжении в области наружных половых органов и влагалища, белых творожистых выделениях из половых органов).
• При подозрении на кандидозный баланопостит (при отечности, покраснении и жжении в области головки полового члена).
• После курса антимикотической терапии урогенитального кандидоза (также в качестве дополнения к культуральным методам исследования кандидоза).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

• кандидозный вульвовагинит,
• кандидозный баланопостит,
• кандидоз мочевыводящих путей,
• колонизация кожи и слизистых грибами Candida albicans в составе нормальной микробиоты человека.

Причины отрицательного результата:

• отсутствие С. albicans в исследуемом материале.



Важные замечания

• Данный анализ сам по себе не может подтвердить грибковую этиологию заболевания, так как носительство C. albicans очень распространено. Он позволяет исключить роль C. albicans в развитии патологического процесса у обследуемого пациента.
• В редких случаях урогенитальный кандидоз может быть вызван другими видами дрожжеподобных грибов (C. glabrata, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis).
• При положительном результате необходимо подтвердить присутствие Candida albicans микроскопией и культуральным методом исследования (посевом). Одновременно необходимо исключать другие инфекционные агенты, вызывающие воспалительные заболевания урогенитальных органов.

Также рекомендуется

• Посев Candida spp./дрожжеподобные грибы с подбором антимикотических препаратов
• Gardnerella vaginalis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Исследование микробиоценоза влагалища с определением чувствительности к антибиотикам
• Herpes Simplex Virus 1/2, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Chlamydia trachomatis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Neisseria gonorrhoeae, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Mycoplasma genitalium, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Mycoplasma hominis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Ureaplasma species, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]
• Trichomonas vaginalis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов женщин (микрофлора), 3 локализации
• Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов мужчин (микрофлора)

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, уролог.

Литература

1. Achkar JM, Fries BC. Candida infections of the genitourinary tract. Clin Micro Reviews. 2010 Apr; 23(2): 253-273.
2. Anaisse E. J., McGinnis M. R., Pfaller M. A. Clinical Mycology. Churchill Livingstone, London, UK; 2003: 608 pp.
3. Журнал “Вопросы медицинской микологии”. Режим доступа: https://www.rusmedserv.com/mycology/html/kandidoz.html

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал (РНК или ДНК). Биологическим материалом для исследования может служить кровь, мазок из половых органов, слюна и прочее.

Метод ПЦР  был открыт в 1983. Его создатель Кэри Мюллис (США), за это открытие получил Нобелевскую премию в области химии. Уже за первые десять лет методика стала обязательным лабораторным исследованием во всем мире, получив признание ученых и врачей.

Медицинский центр Диана предлагает провести исследование по методике полимеразной цепной реакции в кратчайшие сроки и с высочайшим уровнем точности. Наша диагностическая база соответствует всем международным стандартам и требованиям.

Какие инфекции можно диагностировать методом ПЦР

На диагностику отправляют гинеколог, уролог или дерматолог. Анализ ПЦР дает возможность диагностировать большое число разнообразных инфекций. В эту группу попадают и скрытые, бессимптомные заболевания, находящиеся в инкубационном периоде:

С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

• гепатит C, B;
• уреаплазмоз половых органов;
• ИППП – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
• хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
• микоплазмоз половых органов и дыхательных путей;
• бактериальный вагиноз;
• кандидоз половых органов;
• инфекционный мононуклеоз;
• туберкулез;
• сальмонеллез;
• туберкулез (легочные и внелегочные формы);
• листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
• цитомегаловирусную, папилломавирусную, герпесную  инфекцию;
• детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия – краснуху, паротит, дифтерию, корь;
• ВИЧ.

При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР – исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее. Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих. Например, гепатитом А можно заразиться через общие предметы и посуду (болезнь грязных рук), а гепатитом С – только через кровь, медицинские инструменты и половые контакты. Это важно для тех, кто находится рядом с больным.

Суть метода полимеразной цепной реакции

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК. Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах.

ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов. Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

• Универсальность. Метод дает возможность определить все известные на сегодняшний день микроорганизмы, вне зависимости от вида исследуемого материала.
• Специфичность. ПЦР позволяет определить ДНК вируса или бактерии со 100% точностью, что не дает ни один другой способ диагностики.
• Чувствительность – даже один мельчайший «обломок» ДНК или РНК может быть обнаружен и идентифицирован, благодаря быстрой реакции образования копий.
• Оперативность – поставить диагноз на основании полимеразной цепной реакции можно уже через несколько часов после забора биологического материала, что дает возможность своевременно приступить к лечению заболевания.
• Возможность проведения количественного анализа. Эта особенность важна при выявлении болезней, вызванных условно-патогенной флорой (например, молочницы). Повышенное содержание грибков кандида  в организме вызывает заболевание, а нормальное количество до 10 3 – 104 КОЕ/тамп. – нет.

Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

Как сдать анализ ПЦР правильно: подготовка 

Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

• Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
• Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
• С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

Мазок у женщин

Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут мазок из влагалища. При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

• За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
• За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
• За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
• Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
• За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

Мазок у мужчин

Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

• За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
• Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
• Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
• Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

Анализ крови

Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

• Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
• Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
• Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
• Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
• Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

Как проводится тест ПЦР?

Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

• Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
• Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
• Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
• Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
• Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
• Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии;
  соскобы и мазки со слизистых  для диагностики ЗППП;
  клетки слизистой желудка и желудочный сок – для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

При одном взятии материала можно обнаружить сразу нескольких возбудителей, попавших в организм. Такая универсальность избавляет пациента от дополнительных обследований и лишних трат.

Обнаружить и идентифицировать участки генетической информации удается при помощи специальных эталонных маркеров ДНК (праймеров) созданных для каждого известного возбудителя. Эталон позволяет найти «свой» фрагмент среди миллионов других. Если это происходит, запускается реакция полимеразной цепи.

ПЦР—реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами.

Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию. Для работы с эталонами пробирки помещают в специальный прибор. При помощи программы задается алгоритм, несколько раз меняющий температуру среды и влияющий на протекание реакции. Результат ПЦР виден сразу после окончания исследования.

Как расшифровать ПЦР анализ

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

• Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
• Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.

Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Точность расшифровки результатов ПЦР анализа

Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

• Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
• Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
• Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

Поделиться ссылкой: